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食源性大腸桿菌O157:H7感染現(xiàn)狀及常規(guī)檢測方法

更新時間:2018-11-26  |  點擊率:1992

大腸桿菌O157∶H7是大腸桿菌的一種特殊血清型,這種血清又叫“腸出血性大腸桿菌”。大腸桿菌O157∶H7是兩端鈍圓的革蘭氏陰性菌,周身鞭毛,能運動,生長溫度為37℃,44~45℃時生長不良。

 

牛的腸道是大腸桿菌O157∶H7的主要寄居地,大腸桿菌O157∶H7在牛糞中會瞬間繁殖。大腸桿菌O157∶H7的感染劑量很低,每克感染載體含10個活菌即可致病。其致病機理主要是粘附和產(chǎn)毒,病菌進入宿主腸道后與上皮細胞結(jié)合破壞其絨毛,目前普遍認為這種損傷作用與腸上皮細胞纖毛清除素(eae)基因有關(guān)。

 

 

據(jù)WHO統(tǒng)計,在2004年,歐洲聯(lián)盟(17個成員國)和挪威經(jīng)實驗室確認的病例數(shù)為每10萬人口1.3例,而美國同年的發(fā)病率為每10萬人0.9例。在2001年,新西蘭報告的發(fā)病率為每10萬人2例,澳大利亞的發(fā)病率為每10萬人0.2例。

 

腸出血性大腸桿菌(EHEC)[溶血性尿毒癥(hacmoluticuraemicsyndrome,HUS)]的發(fā)生頻率在阿根廷比較高,在6~48個月兒童中的估計值約為每10萬兒童22例HUS。雖然世界其它地方,包括若干非洲國家,也報告發(fā)生EHEC感染,但并不總能收集或方便地獲取具體的發(fā)病率數(shù)據(jù)。EHEC感染及相關(guān)疾病可在任何年齡組發(fā)生,但這種疾病似乎常見于幼兒。

 

日本報道的EHEC患病年齡中值為8歲。2011年美國俄勒岡州共有15人因食用草莓而感染大腸桿菌O157∶H7,6名患者住院,其中4名患者發(fā)展為HUS,2名病人因HUS死亡。2016年美國9個州共有13人因食用特定面粉制成的披薩和面包而感染大腸桿菌O157∶H7,8名患者住院,其中2名患者發(fā)展為HUS。1987年,我國成功分離出該菌之后,十多個省份相繼報道了關(guān)于大腸桿菌O157∶H7感染的情況。2005年鄭州市內(nèi)發(fā)現(xiàn)3例大腸桿菌O157∶H7的感染病例。

 

因此,建立大腸桿菌O157∶H7的檢測方法尤為重要。常規(guī)培養(yǎng)法目前主要依據(jù)GB4789.36—2016《食品安全國家標準 食品微生物學檢驗 大腸埃希氏菌 O157:H7/NM 檢驗》的檢測方法,主要步驟包括增菌、分離、初步生化試驗、鑒定幾個步驟。

 

分離菌種用CT-SMAC和大腸埃希氏菌O157顯色瓊脂平板,締一生物為您推薦幾款上(HiMedia公司)生產(chǎn)的分離大腸埃希氏菌O157的培養(yǎng)基。

大腸桿菌O157:H7顯色培養(yǎng)基(CT-SMAC 平板)貨號:M1340

該培養(yǎng)基特異性強,優(yōu)于普通的CT—SMAC平板。培養(yǎng)基中含有山梨醇。大腸菌群如肺炎克雷伯菌發(fā)酵山梨醇,產(chǎn)生粉紅色菌落,大腸桿菌O157:H7不發(fā)酵山梨醇,為無色菌落。普通大腸桿菌則被鑒別為藍綠色。大多數(shù)革蘭氏陽性菌被結(jié)晶紫和膽鹽抑制。

此型號還有無瘋牛病風險的化學限定培養(yǎng)基可選。

大腸桿菌O157:H7選擇性顯色培養(yǎng)基 貨號:M157

大腸桿菌O157:H7的選擇性顯色培養(yǎng)基,混合的顯色底物區(qū)分大腸桿菌和大腸桿菌O157:H7。山梨醇是可發(fā)酵的碳水化合物。

大腸桿菌——藍綠色

大腸桿菌O157:H7——深紫色至洋紅色

綠膿桿菌——無色

添加月桂基硫酸鈉、膽鹽混合物和選擇性添加劑增加選擇性,可使革蘭氏陽性菌被抑制,因此,可以選擇性分離出大腸桿菌O157:H7,符合我國國標的顯色培養(yǎng)基。

大腸桿菌O157顯色培養(yǎng)基(第二代)貨號:M1574A

 

混合的顯色底物區(qū)分大腸桿菌和大腸桿菌O157:H7。山梨醇是可發(fā)酵的碳水化合物。

大腸桿菌——藍綠色

大腸桿菌O157:H7——深紫色至洋紅色

克雷伯氏菌——無色至藍色,黏液狀

綠膿桿菌——無色

添加的月桂基硫酸鈉和膽鹽混合物增加選擇性,可使革蘭氏陽性菌被抑制。

添加劑FD052——抑制氣單胞菌屬和普羅威登斯菌屬。

 

實際操作過程中可以根據(jù)具體的情況進行選擇。

 

E coli O157∶H7對熱敏感,在60℃30min或75℃1min,可被殺死。它是一種動物源性傳染病,其宿主主要是牛。研究結(jié)果表明,家蠅可以攜帶大腸桿菌O157∶H7,污染菠菜和生菜。另外一些pH值較低的食物如牛肉、牛奶和面食等也成為大腸桿菌O157∶H7感染的來源。有效的檢測出 E coli O157∶H7對人類健康有著重要意義。

 

 

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