腸出血性大腸桿菌感染通常是由大腸桿菌O157:H7引發(fā)的。在我國(guó)國(guó)標(biāo)中,牛肉制品、飼料、即食果蔬、蜜餞、醬腌菜、食用菌及其制品均需查該致病菌。對(duì)于該致病菌,世界微生物培養(yǎng)基生產(chǎn)商HiMedia公司有5款不同的顯色培養(yǎng)基可以用于檢查:
一款即CT-SMAC瓊脂(貨號(hào)M1340),主要根據(jù)O157不發(fā)酵山梨醇、不具備ß-D葡萄糖醛酸酶活性(大腸桿菌有該酶活性)的特點(diǎn),所以菌落為無(wú)色。培養(yǎng)基添加有選擇因子,可抑制雜菌。假單胞菌在此培養(yǎng)基中也為無(wú)色,但氧化酶試驗(yàn)可以區(qū)分(假單胞菌為陽(yáng)性,O157為陰性)。
圖. HiMedia生產(chǎn)CT-SMAC瓊脂(貨號(hào)M1340,英文品名為HiCrome™ MacConkey Sorbitol Agar Base,需添加劑FD147)
另一款O157顯色培養(yǎng)基(貨號(hào)M1574A)也含有山梨醇和選擇因子,但也含有針對(duì)O157細(xì)胞內(nèi)特異性酶的顯色劑,因此O157菌落為深紫色至洋紅色。
HiMedia的第3款O157顯色培養(yǎng)基(貨號(hào)MV157)和第二款幾乎一樣(見(jiàn)下圖),所不同的是增加了選擇因子新生霉素,因而雜菌抑制的效果更好了。值得一提的是,第2款和第3款顯色培養(yǎng)基都可以將假單胞菌(菌落無(wú)色)與O157菌落區(qū)分。
圖. O157顯色培養(yǎng)基(貨號(hào)MV157)
第4款是液體培養(yǎng)基,除了鑒別外,也有增菌的效果。O157為紫色(因缺乏β-葡萄糖醛酸酶活性),大腸桿菌為藍(lán)色,是因?yàn)榕囵B(yǎng)基也含有山梨醇和顯色劑,阪崎克羅諾桿菌為白色,肺炎克雷伯氏菌為藍(lán)綠色,沙門(mén)和志賀均無(wú)色(見(jiàn)下圖)。該顯色增菌肉湯配合添加劑FD230一起使用。FD230含有新生霉素和碲酸鉀,可抑制志賀、大腸桿菌和阪崎,但對(duì)O157沒(méi)有影響。
第5款O157顯色培養(yǎng)基主要是用于液體樣品的薄膜過(guò)濾法(貨號(hào)M1862)(見(jiàn)下圖),主要用于從肉、禽、奶、嬰兒配方乳等食品中分離大腸桿菌O157:H7,也可用于食品中O157的計(jì)數(shù)。薄膜過(guò)濾法的好處是不受食品中抑制成分的影響,可適合大量液體樣本。該培養(yǎng)基除了基于葡萄糖醛酸酶、山梨醇發(fā)酵外,還含有賴氨酸,使賴氨酸脫羧酶陽(yáng)性菌(如O157)代謝后使pH值升高,產(chǎn)生粉色菌落。該培養(yǎng)基也含有選擇因子,抑制革蘭氏陽(yáng)性菌。
圖. O157顯色培養(yǎng)基(貨號(hào)M1862),圖中大腸桿菌——綠色,大腸桿菌O157:H7——粉色,肺炎克雷伯菌——黃色。
HiMedia公司是微生物產(chǎn)品生產(chǎn)商,一直致力于微生物培養(yǎng)基和細(xì)胞培養(yǎng)基的研發(fā)和生產(chǎn),其顯色培養(yǎng)基有80多種,涵蓋各個(gè)領(lǐng)域,包括無(wú)動(dòng)物源成分及化學(xué)限定的,并具有WHO GMP認(rèn)證、ISO9001:2008,ISO13485:2003認(rèn)證,CE和FDA注冊(cè)登記。其產(chǎn)品行銷140多個(gè)國(guó)家。
締一生物作為HiMedia公司在中國(guó)的代理商,在微生物培養(yǎng)和檢測(cè)領(lǐng)域,一如既往地為您帶來(lái)的服務(wù)。