隨著分子生物學(xué)的發(fā)展,核酸編輯、擴(kuò)增、測(cè)序、鑒定等以核酸為中心的技術(shù)變得越來(lái)越先進(jìn)和方便,尤其是單細(xì)胞RNA測(cè)序、數(shù)字PCR和轉(zhuǎn)基因技術(shù)的出現(xiàn),使得核酸技術(shù)應(yīng)用越來(lái)越廣泛,靈敏度也越來(lái)越高。
但同時(shí)也產(chǎn)生一些弊端,主要是:
1)PCR實(shí)驗(yàn)造成DNA大量合成,不可避免地給實(shí)驗(yàn)室?guī)?lái)核酸污染。由于核酸產(chǎn)物不能自動(dòng)降解,因此只會(huì)不斷積聚;
2)由于靈敏度升高,少量污染的DNA或RNA分子也會(huì)被檢測(cè)出來(lái),從而造成實(shí)驗(yàn)偏差。
3)核酸污染也給實(shí)驗(yàn)人員帶來(lái)未知的健康風(fēng)險(xiǎn)。
而傳統(tǒng)的紫外照射法對(duì)祛除DNA污染并不理想,因?yàn)樗鼉H對(duì)500bp以上長(zhǎng)片段有效,對(duì)短片段效果不大。
那么,有沒(méi)有一種更好的方法呢?
這里向您介紹一種高效祛除核酸污染的方法,即:使用德國(guó)Minerva Biolabs公司(簡(jiǎn)稱(chēng)MB)的PCR污染祛除劑PCR Clean™。
PCR Clean™有噴霧和濕巾兩種樣式,在1分鐘之內(nèi)即可有效地祛除核酸污染(對(duì)質(zhì)粒、基因組和DNA、RNA擴(kuò)增片段均高度有效),適合各種實(shí)驗(yàn)臺(tái)、操作區(qū)域、設(shè)備和實(shí)驗(yàn)耗材,高效迅速,使用方便。
PCR Clean™簡(jiǎn)要介紹如下:
1
產(chǎn)品信息(生產(chǎn)商:德國(guó)MB公司)
2
產(chǎn)品的工作原理
通過(guò)中和降解,快速有效祛除物體表面的DNA、RNA以及DNA酶、RNA酶的污染,確保PCR結(jié)果的準(zhǔn)確。
3
產(chǎn)品特點(diǎn)
①快速有效。1分鐘起效。
②使用方便。使用后用干凈紙巾擦干即可。
③成分安全。非堿性,無(wú)致癌性。
④性能穩(wěn)定:室溫保存。65°C存放2周,也不影響產(chǎn)品品質(zhì)。
4
使用方法
1)實(shí)驗(yàn)操作臺(tái)和常用耗材:將PCR Clean™噴在操作臺(tái)或耗材表面,反應(yīng)1分鐘后,用干凈紙巾擦干即可。
2) 電子設(shè)備:用PCR Clean™濕巾擦拭設(shè)備表面,反應(yīng)1分鐘后,用干凈紙巾擦干即可。
3)移液槍?zhuān)喊磸S家說(shuō)明書(shū)從移液槍上拆下套筒。從套筒上取下密封圈和墊片,向套筒充分噴灑PCR Clean™,作用1分鐘后即可用清水沖洗,晾干,再安裝。
說(shuō)明:PCR Clean™ 適用于玻璃、陶瓷、塑料、橡膠、不銹鋼和貴金屬。它不適用于輕金屬和非鐵金屬。
5
MB公司對(duì)PCR Clean™效果的驗(yàn)證
MB公司驗(yàn)證過(guò)PCR Clean™對(duì)塑料、玻璃、樹(shù)脂玻璃、鋁等材料上的核酸污染的祛除效果,發(fā)現(xiàn)PCR Clean™對(duì)來(lái)自所有檢測(cè)表面的DNA擴(kuò)增片段,質(zhì)粒、基因組DNA和RNA污染的去除,是極為有效的,而且起效很快。去除結(jié)果還顯示,和其他常見(jiàn)的DNA清除劑(如乙醇、異丙醇或洗潔精)比較,PCR Clean™的祛除效果和祛除效率都具有顯著的優(yōu)勢(shì)(見(jiàn)下圖)。
圖:不同清除劑對(duì)樹(shù)脂玻璃®(A)、鋁(B)、千思板®(C)、玻璃(D)和塑料薄膜(E)上的大腸桿菌DNA擴(kuò)增片段去除后,用qPCR進(jìn)行檢測(cè)后的擴(kuò)增曲線。結(jié)果顯示,PCR Clean™具有顯著的優(yōu)勢(shì)。
因此,在PCR反應(yīng)前后,經(jīng)常使用PCR污染祛除劑PCR Clean™,會(huì)非常便捷,可理想地保持工作區(qū)域的清潔,避免核酸污染。同時(shí)節(jié)省時(shí)間和支出。而這些給分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室和PCR工作臺(tái)都會(huì)帶來(lái)非常大的幫助。