上一篇文章中,我們說到如果在養(yǎng)細胞的過程中,如何判斷細胞是否被細菌感染以及如何祛除細菌污染。
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細胞培養(yǎng)中的污染監(jiān)控與檢測——細菌
今天我們來討論一下,細胞培養(yǎng)過程中的真菌感染。
二、真菌污染
真菌概述
真菌是一類具真核和細胞壁的異養(yǎng)生物。真菌可以通過孢子延續(xù)種群,典型的營養(yǎng)體為絲狀分支結構。可污染細胞培養(yǎng)基的真菌種類繁多,最常見的有曲霉菌,白色念珠菌,酵母菌,黑霉菌,孢子菌等。
真菌污染癥狀
與其他污染相比,真菌污染更容易被觀察到。具體表現為:
在培養(yǎng)基中會形成淡黃色或白色的漂浮物,肉眼可見,較易被發(fā)現
短期內培養(yǎng)液多不變混濁
顯微鏡下可以看見細胞之間或是培養(yǎng)基中,有縱橫交錯穿行的絲狀,樹枝狀或管狀菌絲
多數菌絲在高倍鏡下可以觀察到鏈狀排列的菌株,而念珠菌及酵母菌菌株呈卵圓形,散落在細胞上及細胞周邊生長。
真菌污染的鑒定
將待檢測的細胞培養(yǎng)基,接種在真菌專用培養(yǎng)基上進行鑒定,例如:馬丁培養(yǎng)基、沙氏培養(yǎng)基等。
真菌污染的處理方法
首先應盡快把污染細胞與其它細胞系隔離開,不要打開培養(yǎng)皿,以免孢子飛出;
同時需要對實驗過程中所用的器材、試劑和操作空間做相應處理:消毒液噴灑、紫外線消毒、高溫滅菌等;
高濃度的抗生素或是抗菌素(兩性霉素 B 、泰樂菌素等)對細胞會產生一定毒性,在使用前可以進行劑量反應實驗確定影響;
跟細菌污染的處理方法類似,通常情況下,霉菌污染的細胞,如果不是特別珍貴,建議直接丟棄。
如何預防支原體的污染
通常來說,被污染的細胞應該丟棄,以避免成為污染源。但對于珍貴的細胞,以往別的品牌的支原體清除劑,其實只是抑制劑,它們抑制支原體的DNA合成和蛋白合成,但無法殺除。是市面上一款具有殺滅作用的清除劑。它提取自枯草桿菌,可與支原體膜特異性結合,破壞膜通透性,導致支原體膨脹破裂而死。