細(xì)胞培養(yǎng)(cell culture)是指在體外模擬體內(nèi)環(huán)境(無菌、適宜溫度、酸堿度和一定營養(yǎng)條件等),使之生存、生長、繁殖并維持主要結(jié)構(gòu)和功能的一種方法。細(xì)胞培養(yǎng)也叫細(xì)胞克隆技術(shù),在生物學(xué)中的正規(guī)名詞為細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)。不論對(duì)于整個(gè)生物工程技術(shù),還是其中之一的生物克隆技術(shù)來說,細(xì)胞培養(yǎng)都是一個(gè)必bu可少的過程,細(xì)胞培養(yǎng)本身就是細(xì)胞的大規(guī)??寺?。細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)可以由一個(gè)細(xì)胞經(jīng)過大量培養(yǎng)成為簡單的單細(xì)胞或極少分化的多細(xì)胞,這是克隆技術(shù)必bu可少的環(huán)節(jié),而且細(xì)胞培養(yǎng)本身就是細(xì)胞的克隆。細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)是細(xì)胞生物學(xué)研究方法中重要和常用技術(shù),通過細(xì)胞培養(yǎng)既可以獲得大量細(xì)胞,又可以借此研究細(xì)胞的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、細(xì)胞的合成代謝、細(xì)胞的生長增殖等。
1、科學(xué)研究:藥物研究開發(fā)與基礎(chǔ)研究
藥物研究與開發(fā):新藥篩選、疫苗
研究與開發(fā)、基因工程藥物研究與開發(fā)、細(xì)胞工程藥物研究與開發(fā)、單克隆抗體制備
基礎(chǔ)研究:藥物作用機(jī)理、基因功能、疾病發(fā)生機(jī)理
2、 生物制藥:疫苗生產(chǎn)、基因工程藥物生產(chǎn)、診斷用和藥用單克隆抗體生產(chǎn)、細(xì)胞工程藥物生產(chǎn)細(xì)胞培養(yǎng)基本條件
3、合適的細(xì)胞培養(yǎng)基合適的細(xì)胞培養(yǎng)基是體外細(xì)胞生長增殖的最重要的條件之一,培養(yǎng)基不僅提供細(xì)胞營養(yǎng)和促使細(xì)胞生長增殖的基礎(chǔ)物質(zhì),而且還提供培養(yǎng)細(xì)胞生長和繁殖的生存環(huán)境。
細(xì)胞培養(yǎng)基的種類很多,按其來源分為合成培養(yǎng)基和天然培養(yǎng)基(目前使用的培養(yǎng)基絕大部分是合成培養(yǎng)基),按其物質(zhì)狀態(tài)分為干粉培養(yǎng)基和液體培養(yǎng)基兩類。干粉培養(yǎng)基需由實(shí)驗(yàn)者自己配制并滅菌,液體培養(yǎng)基由專業(yè)商家提供,用戶可直接使用,非常方便。每種細(xì)胞都有其合適的培養(yǎng)基培養(yǎng)基:MEM、DMEM、 IMDM、 RPMI-1640、F12、F12K (具體細(xì)胞用什么培養(yǎng)基要以細(xì)胞說明書為準(zhǔn),每一種細(xì)胞的培養(yǎng)基都是不一樣的)。
液體培養(yǎng)基保存:
液體培養(yǎng)基保存: 4℃冰箱避光保存,實(shí)驗(yàn)前放入 37℃預(yù)熱。未加血清液體培養(yǎng)基有效期為 12 個(gè)月。液體培養(yǎng)基中的 L- 谷氨酰胺會(huì)隨著儲(chǔ)存時(shí)間的延長而慢慢分解。如果細(xì)胞生長不良,可以再添加適量 L- 谷氨酰胺。
干粉培
養(yǎng)基保存:4℃冰箱避光保存,有效期 36 個(gè)月。
目前,市場上可提供干粉培養(yǎng)基和液體培養(yǎng)基。干粉培養(yǎng)基需使用者自己配制并滅菌,其優(yōu)點(diǎn)是價(jià)格便宜。缺點(diǎn)是配制過程繁瑣,質(zhì)量不易控制。液體培養(yǎng)基是由專業(yè)產(chǎn)家按標(biāo)準(zhǔn)規(guī)模化生產(chǎn),不僅質(zhì)量得到保證,而且使用十分方便。
養(yǎng)細(xì)胞要用好血清!