RNA相關(guān)實(shí)驗(yàn),需要控制核酸酶污染。DNA污染很難清除。即使只有一個(gè)污染的DNA分子被檢測(cè)到,也會(huì)使整個(gè)PCR檢測(cè)過(guò)程出現(xiàn)誤差。為確保PCR試驗(yàn)數(shù)據(jù)準(zhǔn)確,預(yù)防DNA或RNA交叉污染,PCR實(shí)驗(yàn)室大多會(huì)常備DNA/RNA污染清除劑。德國(guó)Minerva Biolabs核酸污染祛除試劑——PCR Clean。
許多不同的真核蛋白靶向兩個(gè)或多個(gè)亞細(xì)胞目的地具有雙重定位的蛋白質(zhì)包括代謝酶、信號(hào)因子和凋亡調(diào)節(jié)因子。蛋白靶向平衡的改變影響重要的生理結(jié)果。雙重靶向通常通過(guò)翻譯后機(jī)制調(diào)節(jié),這種機(jī)制有利于兩個(gè)或多個(gè)競(jìng)爭(zhēng)性靶向信號(hào)中的一個(gè)的作用,或促進(jìn)將多肽保留在特定區(qū)室中的過(guò)程或相互作用。
NET1是一種激活RhoA GTPase的鳥(niǎo)嘌呤核苷酸交換因子(GEF),分布于細(xì)胞核和細(xì)胞質(zhì)中。細(xì)胞質(zhì)NET1調(diào)節(jié)RhoA并控制細(xì)胞骨架和細(xì)胞遷移,而細(xì)胞核NET1被認(rèn)為控制細(xì)胞對(duì)DNA損傷的反應(yīng)。翻譯后修飾可以改變NET1的分布和功能。
然而,有趣的是,NET1基因表達(dá)在mRNA定位水平上表現(xiàn)出額外的調(diào)控水平。NET1 mRNA明顯靶向遷移細(xì)胞的外周突起細(xì)胞質(zhì)區(qū)域。盡管現(xiàn)在已經(jīng)描述了大部分哺乳動(dòng)物mrna在細(xì)胞質(zhì)中的區(qū)隔分布,但這種普遍調(diào)節(jié)模式的確切功能后果尚不清楚。在體內(nèi)腫瘤中觀察到外周NET1 mRNA的定位,這對(duì)癌細(xì)胞的侵襲很重要然而,外周mRNA的定位和翻譯如何影響NET1蛋白的功能尚不清楚。
相關(guān)研究發(fā)表在《Molecular Cell》上,文章標(biāo)題為:“mRNA location and translation rate determine protein targeting to dual destinations"。
NET1 mRNA的位置及其翻譯速率可以影響競(jìng)爭(zhēng)結(jié)構(gòu)域確定新合成蛋白靶向的能力,從而有利于與特定伙伴結(jié)合。這種基于RNA的伴侶選擇機(jī)制提供了一種控制蛋白質(zhì)功能的強(qiáng)大手段。