在生物藥和細(xì)胞治療領(lǐng)域,支原體檢測十分重要,它是避免外源因子污染,保證產(chǎn)品質(zhì)量的重要質(zhì)控手段。
我國藥典規(guī)定,如下領(lǐng)域需要進(jìn)行支原體檢測:
包括主細(xì)胞庫、工作細(xì)胞庫、生產(chǎn)終末細(xì)胞、檢定細(xì)胞、病毒種子批和病毒收獲液、細(xì)胞培養(yǎng)相關(guān)材料如培養(yǎng)基、胰酶、臨床治療用干細(xì)胞和免疫細(xì)胞、
新生牛血清以及雜交瘤細(xì)胞等。
我國藥典規(guī)定的支原體檢測方法為培養(yǎng)法和指示細(xì)胞染色法。但這些方法也存在一些不盡人意之處,如所需時間較長,有的操作復(fù)雜等。2017年我國藥品監(jiān)督管理局發(fā)布了《細(xì)胞治療產(chǎn)品研究與評價技術(shù)指導(dǎo)原則》,其中提到,基于細(xì)胞治療藥物的特點,申請人可以開發(fā)新型的支原體檢測方法進(jìn)行放行檢測,但是檢測方法應(yīng)經(jīng)過充分驗證。即,只要經(jīng)過充分驗證,新型支原體檢測方法是可以替代藥典方法的。2018年中國醫(yī)藥生物技術(shù)協(xié)會聯(lián)合業(yè)內(nèi)專家,也起草發(fā)布了《嵌合抗原受體修飾T細(xì)胞(CAR-T細(xì)胞)制劑制備質(zhì)量管理規(guī)范》,里面同樣提到,CAR-T細(xì)胞制劑質(zhì)制備后需立即進(jìn)行回輸,可采用經(jīng)過驗證的快速檢測方法。其中,每批次的CAR-T細(xì)胞制劑放行檢測項目也包括支原體檢測。
由于支原體污染容易發(fā)生,且肉眼不易識別,因此常規(guī)監(jiān)測和放行檢測均是需要的。支原體檢測產(chǎn)品生產(chǎn)商德國Minerva Biolabs公司(簡稱MB公司)提供有放行檢測用支原體PCR試劑盒,qPCR試劑盒,支原體DNA提取試劑盒、支原體標(biāo)準(zhǔn)品(包括靈敏度標(biāo)準(zhǔn)品、特異性驗證用標(biāo)準(zhǔn)品以及qPCR定量標(biāo)準(zhǔn)品)。支原體PCR試劑盒和qPCR試劑盒均經(jīng)廠家全面驗證(包括靈敏度、特異性和耐用性),達(dá)到歐洲藥典(EP 2.6.7)和日本藥典(JP G3)要求。每個批次產(chǎn)品均有廠家的質(zhì)檢報告(COA)。