細(xì)胞培養(yǎng)過程中的支原體污染:來源、影響及預(yù)防措施
在細(xì)胞培養(yǎng)實驗中,支原體污染是一種常見的污染現(xiàn)象。支原體是一種介于細(xì)菌和病毒之間的微生物,它們具有高度的適應(yīng)性和生存能力,能夠在多種環(huán)境中存活并繁殖。因此,細(xì)胞培養(yǎng)過程中支原體污染的來源多種多樣,對細(xì)胞實驗產(chǎn)生不良影響,需要采取有效的預(yù)防措施。
支原體污染的來源主要包括以下幾個方面:
1、實驗室環(huán)境中可能存在支原體污染源,如空氣中的塵埃、其他培養(yǎng)物中的支原體污染等。2、實驗操作人員的手部、衣物以及實驗器材等都可能成為支原體污染的媒介。
3、細(xì)胞培養(yǎng)基、血清等培養(yǎng)材料也可能受到支原體的污染。
支原體污染對細(xì)胞實驗的不良影響主要體現(xiàn)在以下幾個方面:
1、支原體污染會導(dǎo)致細(xì)胞生長緩慢、形態(tài)改變,甚至引起細(xì)胞死亡,嚴(yán)重影響實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。
2、支原體污染還可能干擾細(xì)胞的代謝過程,影響細(xì)胞的功能和表達(dá),從而干擾實驗結(jié)果的分析和解讀。
3、此外,支原體還可能作為外源性因素,對實驗結(jié)果產(chǎn)生潛在的干擾,使研究者難以區(qū)分細(xì)胞的內(nèi)在變化與外界因素的影響。
為了避免支原體污染,我們可以采取以下預(yù)防措施:
1、加強實驗室的清潔和消毒工作,定期清潔實驗室環(huán)境、實驗器材以及培養(yǎng)箱等設(shè)備,減少支原體污染的風(fēng)險。使用德國MB公司生產(chǎn)的支原體祛除試劑:Mycoplasma Off對實驗室進(jìn)行清潔。
2、實驗操作人員應(yīng)嚴(yán)格遵守實驗室規(guī)范,穿戴專用的實驗服和手套,避免直接接觸細(xì)胞培養(yǎng)物。同時,實驗操作人員應(yīng)定期接受培訓(xùn),提高實驗技能和操作水平,減少操作過程中的污染風(fēng)險。
3、選擇質(zhì)量可靠的培養(yǎng)基、血清等培養(yǎng)材料,避免使用來源不明的培養(yǎng)材料,降低支原體污染的可能性。Ausbian進(jìn)口胎牛血清,經(jīng)過7次無菌過濾,最后3次為3微米濾膜過濾,清除潛在的支原體污染。
除了上述預(yù)防措施外,我們還可以通過定期檢測細(xì)胞培養(yǎng)物中的支原體污染情況來及時發(fā)現(xiàn)并處理污染問題。常用的檢測方法包括PCR檢測、支原體特異性抗體檢測等。一旦發(fā)現(xiàn)支原體污染,應(yīng)立即停止實驗,對污染細(xì)胞進(jìn)行清理和消毒,并對實驗環(huán)境進(jìn)行重新評估和調(diào)整,以防止污染的擴(kuò)散和再次發(fā)生。